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电动组织匀浆器组织匀浆方法
发布时间:2018-02-26 阅读:
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采用微型直流马达驱动研磨杵工作,研磨微量组织,时间短见效快。研磨杵重量轻,适合多种灭茵方式,可重复使用,拆卸方便。是专门为各种高水分、高蛋白、高纤维样品的匀浆和均质而特制的。主要的应用有:牧草/干食品/化学物质的切碎。肉/鱼/水果/蔬菜/预制食品(如比萨、冻肉)/化学物质/医药的均质。
可以在很短的时间内处理好冷动的样品,适用于检测不稳定的分析成分如维生素等。 电动组织匀浆器组织匀浆方法如下:
匀浆 肝每50mg加(裂解液)0.5mlRIPA和5ULPMSF(不能预先加入,否则失效)电动匀浆。
注意保持低温(埋在冰中),快速匀浆。
将样品转移到1.5ml离心管中,12000g离心,4℃,2-3min。
取少量上清进行考马斯亮兰595nm定量。
将所有蛋白样品调至等浓度(用裂解液),加loading buffer后,分成等体积的两部分(分别于-20℃、-70℃储存)。
每次上样前加热98℃,5min。 (提取磷酸化的蛋白还需加Na3VO4 0.1mM及NaF 25mM)。
gel通常在0.5-1h内凝集,过快表示TEMED、APS用量过多,此时胶太硬易龟裂,而且电泳时容易烧胶。
太慢则说明两种试剂用量不够或者系统实际不纯或实效。
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